Datterini Resistenti al ToBRFV

Il Tomato Brown Rugose Fruit Virus (ToBRFV) è un Tobamovirus scoperto di recente e correlato al mosaico del tabacco (TMV) e del pomodoro (ToMV). Il virus colpisce sia i pomodori che i peperoni.

Diversamente da altri Tobamovirus, ToBRFV rompe e supera la resistenza del gene Tm2-2 del pomodoro, che garantisce resistenza a TMV e a ToMV. Dall’attuale bibliografia i geni-L del peperone, che danno resistenza ai Tobamovirus, vengono ritenuti efficaci anche contro ToBRFV. Questo non è ancora tuttavia supportato da prove scientifiche e potrebbe portare il materiale genetico del peperone ad essere una fonte nascosta di infezione qualora il peperone non venisse preso sufficientemente in considerazione.

I sintomi causati da ToBRFV nel pomodoro sono simili a quelli provocati da altri Tobamovirus nelle piante infette: mosaicatura delle foglie, restringimento delle foglie, necrosi su peduncolo, calici e piccioli e/o macchie gialle sui frutti. Un grosso rischio è rappresentato dal fatto che i sintomi possono essere identificati come PepMV o TSWV. È molto importante che le piante sospette di infezione vengano campionate e testate da un laboratorio accreditato.

L'impatto del ToBRFV sulle coltivazioni di peperone sembra essere finora limitato.

Una rapida diffusione era stata dapprima segnalata in Israele. Nel 2018 parte delle coltivazioni di pomodoro in Messico, Stati Uniti, Germania e Italia sono state trovate infette. Da allora la diffusione si è estesa ad altri paesi e allo stesso tempo si è tentato di eradicare il virus. Ad esempio la Germania ha debellato con successo il ToBRFV adottando significative misure di disinfezione.

In questo momento il ToBRFV prevede uno stato di quarantena negli Stati Uniti e nell'UE perché l'impatto sulla coltura può essere significativo.

Frutta, tabacco, piante ospiti (ad es. piante ornamentali), manipolazione delle colture e sementi sono potenziali fonti di diffusione dei Tobamovirus e si prevede che il ToBRFV si comporti analogamente  da questo punto di vista. I Tobamovirus sono noti per resistere a lungo nel suolo, nell'acqua, nel materiale vegetale e nel materiale inerte come indumenti e attrezzi. Essendo una malattia da contatto, le piante e i frutti infetti sono il principale fattore di diffusione del virus all'interno e verso nuove colture.

È noto sui Tobamovirus che i rischi di trasmissione meccanica sono significativamente maggiori rispetto a quelli di trasmissione da seme alla piantina, specialmente quando i semi sono stati sottoposti a trattamenti di sanificazione e la superficie del seme è stata disinfettata.

Produzione di sementi

Syngenta conduce le operazioni di produzione delle sementi adottando rigorose misure igieniche e con produttori professionali in luoghi remoti (isolati). Vengono inoltre impiegate le tecnologie più moderne.

Le località remote, lontane per esempio dalla coltivazione di prodotti frutticoli freschi, consentono di avere una protezione dalla pressione delle malattie e da altri tipi di contaminazioni. I nuovi cicli di produzione di sementi vengono condotti con l’utilizzo di linee parentali di sementi totalmente testati, utilizzando strutture, attrezzature e substrati di coltivazione messi in sicurezza tramite metodi di disinfezione approvati.

In fase di produzione delle sementi i team monitorano costantemente la coltura alla ricerca di eventuali sintomi di infezione. Quando tali sintomi vengono rilevati, si eseguono test validati per stabilire se l'agente patogeno è realmente presente. Dove possibile, viene effettuato come prima azione il test Immunostrip presso la coltivazione.

Syngenta utilizza Immunostrip validati per individuare il ToBRFV.  Eventuali risultati positivi di tale test sono successivamente confermati da un test di laboratorio per una validazione finale.

In attesa della risposta definitiva, vengono messe in atto misure per evitare l’ulteriore diffusione del patogeno sospetto. Queste misure vengono estese quando l'infezione viene confermata e comprendono la separazione delle piante infette, la limitazione dell'accesso all'unità di coltivazione, restrizioni sulla movimentazione delle attrezzature e l'uso di appositi indumenti protettivi. Dopo aver lavorato in questa area, gli operatori non sono più autorizzati a visitare altre aree nello stesso giorno. A completamento del ciclo colturale si procede poi ad un'accurata disinfezione del terreno, degli strumenti, delle attrezzature, ecc.

Test di qualità

Syngenta applica le indicazioni della International Seed Federation (ISF) e i relativi metodi ISHI-Veg per i test sulla salute delle sementi. Questi sono riconosciuti a livello internazionale come metodi di riferimento e accettati come standard di settore. In aggiunta ai rigorosi controlli di gestione della qualità, Syngenta rispetta i requisiti fitosanitari imposti da diversi paesi, quali il National Seed Health System (NSHS) dell'USDA.

L’attuale metodologia si basa su sementi che vengono macinate, il che significa che non solo l'esterno del seme viene testato, ma anche l'interno. Sulla base di un buon campionamento, dell'accuratezza dei test e della percentuale di trasmissione da seme a piantina, questo test si traduce in una elevata affidabilità che nessuna pianta infetta da ToBRFV sarà generata dalle nostre sementi.

Oltre al solido sistema interno di gestione della qualità di Syngenta, la maggioranza dei test sulla sanità delle sementi di pomodoro e di peperone viene effettuata con l’autorizzazione dei Naktuinbouw Authorized Laboratories (NAL). Il sistema assicura che il laboratorio offra e mantenga i livelli di affidabilità richiesti.

Il metodo prevede il campionamento prima dell'analisi, il sistema di garanzia di qualità presso il laboratorio, l'esperienza degli analisti, i protocolli e il rilascio dei risultati attraverso i certificati di qualità NAL e/o i passaporti delle piante dell'UE. Questo è garantito, ad esempio, tramite  frequenti prove di valutazione e audit effettuati da parti terze indipendenti ed esterne.

Per quanto riguarda le operazioni di fornitura, tutti i materiali non vengono commercializzati fino a dimostrazione avvenuta dell’assenza di agenti patogeni tramite i metodi e gli accreditamenti di cui sopra. Il metodo ISHI per i test di Tobamo , tramite i metodi Elisa, ToBRFV-PCR e Biotest è applicato su tutti i lotti di pomodoro e peperone.

Trattamenti sanitari

Tutti i lotti di sementi di pomodoro e di peperone sono sottoposti a trattamento igienico-sanitario attivo contro i Tobamovirus nell'ambito del processo di estrazione delle sementi. Sui pomodori vengono applicati trattamenti con ipoclorito di sodio e fosfato trisodico, efficaci contro batteri e virus. Sui peperoni vengono effettuati trattamenti con fosfato trisodico.

Abbiamo notato che i livelli di infezione e i sintomi possono variare da una varietà all'altra all'interno della nostra gamma. Sono state osservate delle resistenze nei nostri screening interni e stiamo lavorando per impiegare in tempi rapidi questa resistenza in tutta la nostra gamma utilizzando tecnologie moderne.

Si è osservato che le diverse varietà, con e senza tolleranza, presentano anche una variazione dei sintomi in campo. Questo può essere dovuto alle condizioni di coltivazione o alla naturale sensibilità della varietà. Si è visto che la virulenza del ToBRFV può essere più marcata nelle varietà che contengono i geni Tm2-2. Si noti che senza le adeguate misure di contenimento, i materiali privi di forti sintomi fenotipici possono diventare fonti ad alto rischio di diffusione del virus.

Come già accennato, Syngenta presta la massima attenzione per evitare la diffusione di materiale con ToBRFV a clienti o produttori. La produzione, il campionamento e l'analisi vengono effettuati secondo gli standard internazionali per il commercio di sementi e le autorizzazioni NAL o NSHS al fine di garantire la qualità in tutti gli ambiti dei test delle sementi. Viene applicato un metodo accreditato ISHI per il rilevamento della presenza di ToBRFV.

Quando un cliente sospetta un'infezione da ToBRFV, si consiglia di effettuare un rapido controllo con i test (Immunostrip e/o in laboratorio) e di mettersi in contatto con un funzionario Syngenta che potrà a sua volta consultarsi con altre funzioni aziendali.

Quando si lavora in campo, è necessario sapere che l’infezione da ToBRFV si diffonde molto facilmente; ad esempio, attraverso calzature, abbigliamento o gioielli. Attenersi a norme igieniche stringenti quando si visita un coltivatore o un produttore di sementi o di prodotti freschi è nell'interesse di tutta l'industria orticola.

Tali misure contemplano forti limitazioni delle visite alle serre e una maggiore attenzione riguardo l'uso di indumenti puliti o monouso. Questo protocollo è paragonabile alle misure già  previste per il Clavibacter.

Da notare che i tipi di disinfettanti richiesti sono diversi tra Virus (Tobamo, latte scremato) e Batteri (Clavibacter, Alcool) e che il ToBRFV può essere presente sia nel pomodoro, sia nel peperone.

La seguente è una traduzione non ufficiale del documento "Hygiene protocol tomato Version" redatto da Glastuinbouw Nederland in collaborazione con GroentenFruit Huis, Plantum e Groen Agro Control e trasmesso dalla NPPO olandese (NVWA) tramite il loro sito web fornito unicamente a titolo di riferimento.

I trattamenti citati sono stati selezionati in base alla loro ammissione. I reagenti devono essere applicati nel modo prescritto, pena la non efficacia. Tuttavia, non tutti i trattamenti sono ritenuti efficaci.

Misure igieniche personali e professionali da adottare durante la visita alle unità di coltivazione dei clienti:

• Indossare pantaloni e camicia puliti ogni giorno.

• Lavarsi le mani all'arrivo e alla partenza dall'azienda utilizzando un disinfettante efficace (Virus => Proteine (latte), Batteri => Alcool).

• Lavarsi le mani tra le diverse unità aziendali (serra, mensa, toilette), prima e dopo l'ingresso.

• Evitare di portare gioielli, orologi e telefoni nella serra. Ove necessario, i telefoni possono essere riposti in un sacchetto di plastica che deve essere cambiato tra le diverse unità.

• Non rispondere alle chiamate al cellulare quando si è in serra.

• Pulire gli occhiali con salviettine disinfettanti a base di alcol tra un'unità operativa e l'altra.

• Entrare nella serra calpestando il  tappeto di disinfezione o utilizzare il dispositivo igienizzante per garantire la pulizia delle calzature.

• Indossare indumenti e calzature protettive nelle aree potenzialmente infette.

• Lavare o smaltire gli indumenti al termine del lavoro. Assicurarsi che gli indumenti monouso vengano effettivamente smaltiti.

• Non toccare nessuna pianta senza indossare guanti monouso.

• Sfilare i guanti a partire dal polso verso l’esterno in modo che il guanto risulti al rovescio.

• Il materiale vegetale, i guanti, il terriccio, i bastoncini, le etichette ecc. che sono stati a contatto o che provengono da piante infette/sospette devono essere disinfettati o smaltiti in sacchi o contenitori chiusi.

• Quando si vedono piante sospette, verificare con il coltivatore che queste siano state sottoposte a test di laboratorio.

• Consentire la visita solo alle persone indispensabili. Limitare le visite e le dimensioni del gruppo.

• Evitare di visitare più serre nel corso dello stesso giorno.

• Evitare di visitare i vivaisti durante la fase di crescita delle piante. Questo vale in particolare quando la vecchia coltura è ancora presente presso le aziende che vengono visitate lo stesso giorno.

• In caso di visita a una (sospetta) serra infetta, cambiare gli indumenti prima di visitare il coltivatore successivo.

• Non è consentito portare pomodori o peperoni da casa o da una serra all'altra.

• Informare i coltivatori riguardo le misure igieniche da adottare nel caso in cui si osservino aree a rischio nella loro serra.

I team Syngenta che si occupano delle relazioni con i clienti vengono costantemente aggiornati in merito ai protocolli di igiene del settore. Essi avvisano / informano i coltivatori in caso di lacune nell’applicazione delle norme igienico-sanitarie nel corso di una visita. Viene loro raccomandato di dotarsi di indumenti protettivi propri quando visitano i clienti.

Le misure igieniche correlate al ToBRFV si riferiscono alle fonti idriche, alla disinfezione durante la manutenzione delle colture e ai cambiamenti del ciclo colturale. Per alcuni coltivatori questo può risultare in un aumento delle misure sanitarie nel cui ambito dovranno adottare nuovi modi di operare.